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單精子注射實(shí)驗(yàn)

簡要描述:單精子注射實(shí)驗(yàn)(ICSI) 是一種顯微操作輔助生殖技術(shù),通過物理方式將單個(gè)精子直接注入成熟卵母細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),強(qiáng)制完成受精過程。

  • 更新時(shí)間:2025-07-17
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詳細(xì)介紹

一、技術(shù)定義與核心原理

單精子注射(ICSI) 是一種顯微操作輔助生殖技術(shù),通過物理方式將單個(gè)精子直接注入成熟卵母細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),強(qiáng)制完成受精過程。其核心原理包括:

  1. 繞過自然受精屏障

    • 規(guī)避精子獲能、頂體反應(yīng)及卵膜穿透等自然步驟,直接解決精子活力低下、形態(tài)異常或卵母細(xì)胞膜穿透障礙等問題。

  2. 精卵強(qiáng)制融合

    • 通過顯wei針機(jī)械刺激卵母細(xì)胞,激活鈣振蕩信號通路,啟動(dòng)胚胎發(fā)育。

  3. 遺傳物質(zhì)高效利用

    • 單精子即可完成受精,顯著節(jié)省珍貴遺傳資源(如瀕危物種精液、死亡個(gè)體冷凍樣本)。

生物學(xué)意義:ICSI不僅是受精失?。ㄈ缍嗑肼?、精子無能)的補(bǔ)救方案,更是研究受精機(jī)制與胚胎發(fā)育的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)?zāi)P?/span>。


二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(以馬為例)

1. 卵母細(xì)胞采集與成熟

步驟技術(shù)要點(diǎn)成功率
活體卵巢穿刺(OPU)超聲引導(dǎo)經(jīng)陰道穿刺卵泡,吸取卵丘-卵母復(fù)合體(COCs)60–70%獲卵率
體外成熟培養(yǎng)(IVM)未成熟卵子在含激素(FSH/LH)培養(yǎng)基中培養(yǎng)24–36小時(shí)至MII期50–60%成熟率

2. 精子處理與注射

  • 精子來源:新鮮精液、冷凍復(fù)蘇精液、附睪穿刺精子甚至死精(需化學(xué)激活)。

  • 注射關(guān)鍵操作

    • 精子制動(dòng):顯微zhen機(jī)械損傷尾部,增強(qiáng)受精能力。

    • 顯微注射:固定卵子→穿刺透明帶→注入精子(需<0.5 pL胞質(zhì)抽吸驗(yàn)證)。

       

3. 胚胎培養(yǎng)與移植

  • 體外培養(yǎng):受精卵在KSOM/SOF培養(yǎng)基中培養(yǎng)至囊胚(約7–10天)。

  • 移植策略

    • 手術(shù)移植:早期胚胎植入受體輸卵管(高妊娠率但侵入性強(qiáng))。

    • 非手術(shù)移植:囊胚期經(jīng)宮頸植入子宮(主流趨勢)。


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